تحليل الإليزا أو ما يعرف بالمقايسة الامتصاصية المناعية للإنزيم المرتبط ( بالإنجليزية : ELISA enzyme - linked immunosorbent assay )


2 قراءة دقيقة


وهو اختبار يقيس ويكشف عن وجود أجسام مضادة معينة في الدم ؛ والأجسام المضادة هي بروتينات يقوم الجسم بإنتاجها للدفاع عن نفسه ضد المستضادات التي تدل على الإصابة بالعدوى والأمراض ، ويجري هذا التحليل عن طريق أخذ عينة من الدم ، ومن ثم إرسالها إلى المختبر ليقوم الفني المختصة بوضع العينة في طبق يحتوي على المستضد المحدد المراد الكشف عنه ، فإذا كان الدم يحتوي على أجسام مضادة لهذا المستضد : سيرتبط الاثنان معا ويحدث تغير في اللون ، ومن ثم يتم قياس مقدار التغير الحاصل في اللون ، الذي يعطي بدوره انطباعا عن كمية الأجسام المضادة الموجودة في الجسم ، ومن ثم ترسل النتيجة للطبيب المختص لقراءة النتيجة وتشخيص الحالة ، وتجدر الإشارة إلى أنه من الممكن أن يعطي الفحص نتائج خاطئة ؛ فقد تكون نتيجة سلبية كاذبة ، أي أن يشير التحليل إلى عدم وجود الأجسام المضادة التي تدل مرض ما بالرغم من وجودها بالفعل ، أو العكس في حالات النتائج الإيجابية الخاطئة ، وفي هذه الحالات قد يطلب الطبيب إعادة التحليل مرة أخرى خلال بضعة أسابيع ، أو القيام بإجراء اختبارات أكثر حساسية لتأكيد النتائج .
‏▪️ أنواع تحليل الإليزا هنالك نوعان رئيسان لتحليل الإليزا ، وفيما يأتي شرح لكل منهما : 1- تحليل الإليزا المباشر : وفي هذا النوع يتم قياس نسبة وجود المستضد في عينة الدم وهو سبب د لسم المنع المرض ، فيكون طبق الإليزا مطلية بالأجسام المضادة التي ترتبط بالمستضد في حال وجوده والكشف عنه . 2- تحليل الإليزا غير المباشر : ( بالإنجليزية : Indirect ELISA ) يعمل على قياس وجود الأجسام المضادة التي ينتجها الجسم نتيجة دفاعه ضد المستضد ، حيث يعمل عكس طريقة الإليزا المباشرة ، فالطبق يحتوي على المستضد ليكشف عن وجود أجسام مضادة في العينة المأخوذة من المريض أو عدمها .
◾️إيجابيات وسلبيات الإليزا هنالك بعض الإيجابيات والسلبيات لاستخدام طريقة الإليزا للكشف عن مسببات الأمراض ، وفيما يأتي ذكر لبعض منهم :
▪️ميزات تحليل الإليزا : حساسية الفحص ودفته العالية ؛ حيث تعمل تقنية الإليزا على اكتشاف المستضدات حتى وإن كانت بكميات قليلة جدا على مستوى البيكوجرام . إنتاجية مرتفعة ؛ حيث إن أغلب الأشكال التجارية للإليزا توفر ألواحا ب 96 حجرة . سهولة الاستخدام .إمكانية اختبار أنواع مختلفة من العينات ، مثل ؛ مصل الدم ، والبلازما ، والأنسجة ، والبول ، واللعاب .
▪️سلبيات تحليل الإليزا : يعطي قراءات محددة بفترة زمنية وذلك لأنه يعتمد على تفاعلات الإنزيم ، وبالتالي يجب الحصول على النتائج والقراءات خلال فترة زمنية قصيرة . يعطي معلومات محدودة عن المستضد المسبب للمرض ، فهو يكشف فقط عن وجوده أو كميته في العينة .
▪️الأدوات المستخدمة في تحليل الإليزا يستخدم لفحص الإليزا عدة مواد وأدوات ، وفيما يأتي تفصيل لذلك :1- قارئة الإليزا : ( بالإنجليزية : ELISA Readers ) ، ويجب أن تحتوي على مرشح يغطي ما بين 450-650 نانومتر . 2- ماصة : ( بالإنجليزي : Pipette ) ، وتتوفر بأشكال مختلفة ، منها ما يكون قابلا لتعديل سعتها لسحب كميات مختلفة . 3- نظام الغسيل : ( بالإنجليزية : Washing system ) ، قد يكون نظام الغسيل نظاما يدويا ؛ يغسل صفا أو عمودا واحدا في نفس الوقت ، أو نظاما شبه آلي ؛ يغسل شريطا أو لوحة واحدة في وقت واحد ، أو أنظمة آلية بالكامل ؛ يمكنها غسل ألواح متعددة .4- ألواح مطلية : وهي ألواح من البوليسترين مكونة من 96 قطعة ، ومغلفة إما بمستضد غير نشط أو جسم مضاد . 5- ضوابط : تستخدم الضوابط ( بالإنجليزية : Controls ) للتحقق من صحة الفحص ، ولحساب نتائج العينة ، فهنالك نوعين من الضوابط لكل مجموعة ، وهما : الإيجابي والسلبي . 6- إنزيم مقترن : ( بالإنجليزية : Conjugated Enzyme ) ، وهي عبارة عن إنزيم مرتبط بأجسام مضادة تتفاعل بطريقة خاصة مع العينة . 7- محلول الغسيل : ( بالإنجليزية : Wash concentrate ) ، والذي يعمل كمحلول لغسل المواد غير المرتبطة من اللوحة 8- محلول وقف التفاعل : ( بالإنجليزية : Stop solution ) ، وهو محلول يتم إضافته لوقف التفاعل وايقاف تغير اللون.


ELISA (ELISA enzyme - linked immunosorbent assay), a test that measures and detects the presence of certain antibodies in the blood; Antibodies are proteins that the body produces to defend itself against antigens that indicate infection and diseases, and this analysis is carried out by taking a sample of blood, and then sending it to the laboratory so that the competent technician puts the sample in a dish containing the specific antigen to be detected. The blood contains antibodies to this antigen: the two will bind together and a change in color will occur, and then the amount of the change in the color is measured, which in turn gives an impression of the amount of antibodies present in the body, and then the result is sent to the specialist doctor to read the result and diagnose the condition, It should be noted that it is possible for the examination to give false results; It may be a false negative result, meaning that the analysis indicates the absence of antibodies that indicate a disease despite their actual presence, or vice versa in cases of false positive results, and in these cases the doctor may request a re-analysis again within a few weeks, or conduct tests. More sensitive to confirm results.

Types of ELISA analysis There are two main types of ELISA analysis, and the following is an explanation for each of them: and direct ELISA analysis, and in this type the presence of the antigen in the blood sample is measured, which is the cause of the disease, so the ELISA dish is coated with the antibodies that bind to the antigen if it is present and detected. Indirect ELISA analysis: It measures the presence of antibodies produced by the body as a result of its defense against the antigen, as it works opposite to the direct ELISA method, as the dish contains the antigen to detect the presence of antibodies in the sample taken from the patient or not. The pros and cons of ELISA There are some pros and cons of using the ELISA method to detect pathogens, and some of them are mentioned below: Features of the ELISA analysis: the sensitivity of the examination and its high rudder; Where the ELISA technique detects antigens, even if they are in very small quantities at the level of the biogram. High productivity; Whereas, most commercial forms of ELISA provide panels with 96 rooms. Ease of use, all steps are easy to follow.
The possibility of testing different types of samples, such as; Serum, plasma, tissues, urine and saliva. Disadvantages of ELISA analysis: gives time-bound readings; This is because it depends on the reactions of the enzyme, and therefore results and readings must be obtained within a short period of time. It gives limited information about the pathogenic antigen, it only reveals its presence or quantity in the sample.
The tools used in the analysis of ELISA are used to examine the ELISA several materials and tools, and the following is a detail for that: The ELISA reader: (in English: ELISA Readers), and it must contain a filter covering between 450-650 nm. Pipette: (English: Pipette), and it is available in different forms, some of which are subject to adjustable capacity to draw different quantities. Washing system: The washing system may be a manual system; Wash one row or column at the same time, or a semi-automatic system; Wash one strip or plate at a time, or fully automatic systems; It can wash multiple panels. Coated panels: These are 96-piece polystyrene panels coated with either inactive antigen or antibody. Controls: Controls are used to verify the validity of the examination, and to calculate the results of the sample. There are two types of controls for each group, namely: positive and negative. Conjugated enzyme, which is an enzyme bound to an antibody that interacts in a special way with the sample. Washing solution: (in English: Wash concentrate), which works as a solution to wash the unconnected substances from the plate. Stop solution: It is a solution that is added to stop the reaction and stop the color change.



Dr:leena abd alsalam Alkurdi

تعليقات
* لن يتم نشر هذا البريد الإلكتروني على الموقع.